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本发明公开了一种基于上转换荧光适配体的侧流试纸检测方法,属于环境检测和食品安全检测技术领域。该方法在纳米金颗粒表面修饰能特异性的识别目标细菌的核酸适配子,在稀土上转换荧光颗粒表面修饰与适配子互补配对的cDNA,两种纳米颗粒混合后,由于两段核酸序列的碱基互补配对,两种颗粒的距离被拉近,从而导致上转换荧光颗粒的荧光被纳米金颗粒猝灭。当加入目标物后,目标物会与cDNA竞争性与适配子结合,从而导致上转换纳米颗粒的荧光恢复。根据不同的荧光恢复强度,可以实现对目标细菌的定量测量。本发明方法灵敏度高,特异性强,操作简便,通过适配子序列的改变可以测定各种目标物,在环境监测及食品分析等方面具有十分重要的意义。