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本发明涉及一种像素界定层及其制备方法和应用,该像素界定层,包括第一像素界定层和层叠设置于所述第一像素界定层上的第二像素界定层;所述第一像素界定层由至少一种以下材料组成:非稀土元素的一元或多元金属氧化物、非稀土元素的一元或多元金属氮化物、非稀土元素的一元或多元金属硫化物、碳化硅、氧化硅、氮化硅、氮氧化硅;所述第二像素界定层由至少一种稀土氧化物组成。上述像素界定层能避免使用PI作为bank层时面临的问题,具有明确亲疏水分界线的bank层,能保证同样体积的墨水在不同像素中获得相同高度、相同均匀性的薄膜。