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本发明涉及一种稀土上转换纳米颗粒及其制备方法和用途,所述稀土上转换纳米颗粒由内而外依次包括:激活剂壳层、能量迁移剂壳层和敏化剂壳层,且各层均含有Yb3+;其中,Yb3+的掺杂浓度由内而外逐层降低。本发明通过设置镱离子掺杂浓度梯度能有效地将敏化剂的激发态能量迁移至激活剂,有效提高了稀土上转换纳米颗粒的上转换发光量子产率,达到0.22%,实现了在激发光源强度为2W/cm2的800nm连续激光激发,其在红外LED光源激发下能产生很强的上转换发光,使得其可以借助红外LED光源独有的封装与阵列技术,可以设计出基于稀土上转换纳米颗粒发光探针的便携式检测设备,进一步拓展了上转换发光材料在生物医学领域中的应用。