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本发明公开了一种肉羊舍饲棉花秸秆生物饲料的制备方法,包括以下步骤:先将棉花秸秆粉碎并与棉籽粕混合,然后制备酵母菌活化液、乳酸菌活化液、纤维素酶和木聚糖酶的混合液,再将硫酸铵、硫酸亚铁、氯化钠、蔗糖和硫酸镁溶解,将菌液和溶液混匀注入发酵物料中,发酵后,将微量元素、磷酸二氢钙、稀土、氨基酸、辣椒粕和玉米粉充分混匀,并与发酵产物混合制成饲料颗粒成品。本发明的有益效果为:乳酸菌能够改善动物体内微生态环境,增强免疫力;棉花秸秆变废为宝,解决饲料短缺问题,减少了焚烧处理的环境污染;棉花秸秆和棉籽粕结合,可显著提高粗蛋白含量,降低饲料的中性洗涤纤维含量,降低动物体增热,提高饲料代谢能用于维持和生产的效率。