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本发明涉及一种双稀土配合物、其掺杂的Ag@SiO2荧光纳米粒子及其制备方法。该荧光纳米粒子以双稀土配合物Eu3+/Tb3+-PABA-DTPA-APTMS掺杂的银为内核,在内核表面覆盖有网状结构的二氧化硅,在二氧化桂表面带有活性氨基基团,其中双稀土配合物Eu3+/Tb3+-PABA-DTPA-APTMS与银的质量比为:1∶0.176~0.2;内核与二氧化硅的质量比为:1∶5~12,且每毫克纳米粒子含有595~630nmol氨基。本发明的纳米粒子中Eu3+与Tb3+在最大发射峰处的荧光强度较Eu3+/Tb3+-PABA-DTPA-APTMS掺杂的没有银核的SiO2荧光纳米粒子分别提高了3.0和3.4倍,所制备的纳米粒子呈规则球状,大小均匀,粒径为120±5nm,具有良好的单分散性和光稳定性,纳米粒子表面带有氨基,可不需要进行表面修饰而直接与生物分子反应。该纳米粒子可望作为一种新型的稀土荧光探针应用于高灵敏检测的时间分辨荧光免疫分析、生物传感器、生物芯片等。