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本发明涉及均相时间分辨荧光免疫分析螯合剂及其制备方法。该螯合剂为：N，N，N’，N’－[[2，6－二(3’－氨甲基)－1－吡唑]－4－(4－异硫氰基(苯基乙炔)－吡啶)]－四乙酸。其发光基团为2，6－二(吡唑)吡啶；具有高三重态能量水平，结合稀土离子后激发波长为320nm，发射波长为520－620nm，发光寿命为2.99ms，量子产率0.58，符合均相TRFIA的要求在吡啶4－位结合苯乙炔，乙炔键可阻断联结蛋白大分子对发光能量的消耗。在吡啶4位苯基4－联结异硫氰基可无损伤的偶联蛋白质，有利于对螯合剂发光的高效测量。11配位的多氨多羧基结构，可排除水分子对稀土发光的淬灭作用，提高螯合剂在水中的溶解性和在水r溶液中的动力稳定性。