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本发明涉及医学免疫学中荧光免疫层析技术领域,具体地说是一种β 人绒毛膜促性腺激素测定试剂盒及制作方法,设有试纸卡,其特征在于所述试纸卡由下至上依次设有:PVC板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,其中结合垫上吸附有稀土Eu3+荧光微球标记的β 人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体,所述稀土荧光微球的直径为150nm,稀土荧光微球含稀土镧系元素Eu3+,在基态下稳定,在337nm的激发光源作用下发射出波长615nm的荧光;所述单克隆抗体为纯化后混合的单克隆抗体,来源于针对2 6个不同的β 人绒毛膜促性腺激素抗原表位的单克隆抗体细胞株,具有操作简便、反应快速、灵敏度高、特异性强等优点。