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本发明公开了一种稀土配合物荧光探针对金霉素药物的测定方法,包括:将氨基乙酸-NaOH缓冲溶液、Tb3+贮备液、十二烷基苯磺酸钠水溶液和含金霉素类药物的待测样品混合,加水定容,摇匀并放置15~60min,作为供试液;在激发波长为290~300nm,扫描速度为300~1000nm/min,激发狭缝宽度和发射狭缝宽度均为5~15nm的荧光分析仪中,测定供试液发射波长540~550nm处的荧光强度。该方法通过加入十二烷基苯磺酸钠,使体系的荧光强度提高了3倍,提高了检测的灵敏度,且操作简单、快速、准确,具有高的灵敏度与好的选择性,应用范围广泛,是金霉素类药物测定的理想方法。