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本实用新型公开了属于荧光免疫层析检测技术领域,具体涉及一种同时检测四环素类和磺胺类抗生素的荧光试纸条。所述荧光试纸条包括PVC底板、样品垫、反应膜、吸水纸;其中,样片垫、反应膜和吸水纸均为位于PVC底板上,且样品垫和吸水纸分别位于反应膜的两侧并与反应膜接触;所述荧光试纸条使用时采用的检测试剂包括四环素类抗生素单克隆抗体 稀土铕红色荧光标记物和磺胺类抗生素单克隆抗体 稀土铕红色荧光标记物,且冻干于塑料试剂桶中。所述荧光试纸条具有便携性好、灵敏度高、检测时间短、可以同时检测四环素类和磺胺类抗生素等特点,在多类抗生素同时检测中发挥重要作用。