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本实用新型公开了一种采用时间分辨荧光免疫层析方法同时定量检测总前列腺特异性抗原和游离前列腺特异性抗原含量的试纸条和纸质卡;本实用新型的试纸条包括底板和在底板顺次粘覆的吸水纸、硝酸纤维素膜、结合垫以及样品垫,在硝酸纤维素膜上相间隔平行依次设置fPSA划膜抗体的第一检测带、复合PSA划膜抗体的第二检测带以及兔抗鼠多克隆抗体的质控带,结合垫表面喷涂偶联有镧系稀土离子的纳米微球的复合前列腺特异性抗原抗体和游离前列腺特异性抗原抗体,可以保证同一样品液体中的tPSA和fPSA的检测检测结果精确度高、误差小,为临床使用提供了极大便利。